Exame de VEROTOXINA em São Paulo

Sinonímia:
Verotoxina 1 e 2 (toxina Shiga-like I e II) da Escherichia coli O157:H7. VTEC. VT. SLT I e II.
EHEC. Entero-Haemorrhagic Escherichia coli.


Fisiologia:
Enterobactérias do tipo Escherichia coli fazem parte da flora intestinal normal dos humanos e da de muitos animais domésticos. Elas representam um indicador de contaminação por coliformes fecais na água e nos alimentos. São bacilos Gram-negativos, anaeróbios facultativos e móveis com flagelos peritríquios.
Devido aos antígenos “O” (LPS da membrana exterior) e aos antígenos “H” (dos flagelos), as E. coli podem ser divididas em diferentes serovares. Através de vários fatores de patogenicidade, frequentemente codificados por plasmídeos ou transmitidos através de fagos, as E. coli devem ser consideradas facultativamente como enteropatogênicas. Desde 1977 as E. coli são conhecidas como capazes de produzir duas citotoxinas, Verotoxina 1 e 2. Os genes dessas verotoxinas (VT) são localizados no cromossomo na área de um profago. Foram isoladas E. coli que continham ambos os genes ou apenas um deles. Devido à similaridade da verotoxina com a toxina Shiga da disenteria shigellar, ela também é denominada Shiga-like Toxine I e II (SLT-I e II).
Uma parte desta E. coli (VTEC) formadora de verotoxina pode causar, através da formação de outros fatores de patogenicidade, fortes diarreias hemorrágicas. O “protótipo” desta E. coli (EHEC) entero-hemorrágica foi descrito pela primeira vez em 1982; fazia parte do Serovar O157:H7. Depois disso, foram descritos EHEC dos mais diferentes O-Serovares. Outros fatores importantes de patogenicidade que caracterizam o tipo EHEC, são uma entero-hemolisina codificada por plasmídeo e uma adesina intimina, cujo gene (eae A), juntamente com os genes de outros fatores de virulência, é localizado em uma ilha de patogenicidade (PAI= Pathogenicity Island) no cromossomo. Os sintomas clínicos, que são causados pelo EHEC, vão desde diarreias leves até gastrenterites fortes ou mesmo colites hemorrágicas, que ocorrem em aproximadamente 10 a 20 % das infecções. Como pode ocorrer uma complicação pós-infecciosa de risco fatal em 5 a 10 % das infecções, principalmente em recém-nascidos e crianças pequenas, mas também em pacientes idosos ou com sistema imunitário enfraquecido, a formação de uma S. hemolítica-urêmica (HUS) ou uma púrpura trombocitopênica-trombótica (TTP).
A letalidade com HUS e TTP é especialmente alta na infância (10 a 15 %). Pode ocorrer uma disfunção renal aguda, com obrigatoriedade transitória de diálise, mas também pode ocorrer uma perda irreversível da função renal com obrigatoriedade de diálise frequente. O desenvolvimento do quadro clínico depende, por um lado, da predisposição do paciente e, por outro, do respectivo fenótipo EHEC; isto significa que o processo da doença também depende das diferentes expressões dos fatores de patogenicidade.


Material Biológico:
Fezes e culturas de enriquecimento.

Coleta:
As amostras de fezes ou coletas anais não devem ser colocadas em recipientes que contenham meio de transporte com conservantes, soros animais, íons metálicos, agentes oxidantes ou detergentes, pois podem interferir com o teste. Se coletas anais forem utilizadas, deve-se observar que o material de fezes disponível para o teste seja suficiente (aproximadamente 100 mg). Nos exames ambientais, amostras de fezes das pessoas contactantes, clinicamente insuspeitas, também devem ser coletadas para identificar possíveis portadores assintomáticos.


Armazenamento:
O material para exame deve ser mantido entre +2 a +8 °C até ser utilizado. Se o material não for utilizado para o teste dentro de 3 dias, recomenda-se uma armazenagem a -20 °C ou mais frio.


Exames Afins:
Coprocultura.

Valor Normal:
Cálculo do Valor Marginal (VM):

onde:
Abs Am = Absorbância da Amostra pelo método
                  ELISA
VM = Valor Marginal calculado conforme a
          amostra e a Absorbância do Controle
          Negativo pelo método ELISA


Interferentes:
Deve-se evitar congelamento e descongelamento repetido das amostras.


Método:
RIDASCREEN® Verotoxin – ELISA – enzimaimunoensaio para a detecção qualitativa.


Interpretação:
Exame útil no diagnóstico das infecções ou contaminações por Escherichia coli enteropatogênica.
Ver Fisiologia.


Sitiografia:
E-mail do autor: ciriades@yahoo.com
http://www.r-biopharm.com/clinical/instructions/C2201%20Verotoxin%2004-11-23_PT_final.pdf

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