Exame de NUCLEOTIDASE em São Paulo
Sinonímia:
5′ Nucleotidase. EC 3.2.2.5
Fisiologia:
A 5′ Nucleotidase (5’ND) é uma fosfo-monoesterase que hidrolisa especificamente a ligação éster fosfórico da ligação ribose-5′-fosfato dos nucleotídeos.
Essa enzima é achada essencialmente no fígado, mas também nos rins e no sêmen. Enzima da membrana dos hepatócitos, presente em grande quantidade ao nível das paredes dos canalículos biliares. Não agindo sobre os substratos habituais das fosfatases, a determinação de sua atividade é de grande interesse no diagnóstico das colestases das quais ela é um marcador sensível e mais específico do que as outras enzimas da membrana hepatocítica. De fato, a 5′ Nucleotidase não se eleva nas afecções ósseas ou durante o crescimento como as fosfatases alcalinas e nem durante a gravidez como a leucina-aminopeptidase cuja atividade aumenta em decorrência de sua síntese placentária. Ela também não é modificada por indutores enzimáticos como certos medicamentos ou bebidas alcoólicas, caso da γ-GT.
Material Biológico:
Soro.
Coleta:
2,0 ml de soro.
Armazenamento:
O soro deve ser conservado refrigerado entre +2 a +8ºC para até 48 horas ou a -20ºC para prazos maiores. Não estocar em freezer tipo frost-free.
Exames Afins:
Fosfatase alcalina. γ-GT. Leucina-amino-peptidase. Bilirrubinas.
Preparo do Paciente:
Jejum de 4 ou mais horas. Água ad libitum.
Método:
O princípio de sua determinação colorimétrica é o seguinte: a 5’ND hidrolisa a adenosina-5-monofosfato (AMP) a adenosina e fósforo inorgânico.
Ao mesmo tempo as fosfatases inespecíficas do soro também hidrolisam a AMP. O glicerol fosfato é clivado em glicerol e fósforo apenas pelas fosfatases inespecíficas. Assim a diferença entre a medida colorimétrica do fósforo liberado usando AMP e glicerol fosfato como substratos, reflete a atividade da 5’ND. O princípio de sua determinação enzimática é o seguinte: a 5’ND hidrolisa a adenosina-5′-monofosfato (AMP) a adenosina e fósforo inorgânico. A adenosina sofre em seguida uma deaminação pela adenosina deaminase resultando em inosina e um íon amônia que se fixa graças à L-glutamato-desidrogenase em presença de NADH ao 2-oxoglutarato para dar L-glutamato, NAD e H2O.
Interpretação:
AUMENTO: afecções hepato-biliares, principalmente durante colestases intra ou extra-hepáticas (obstrução da via biliar principal, hepatite colestática, cirrose biliar primária, carcinoma hepático, câncer pancreático, metástases hepáticas de carcinoma mamário e outros). Existe uma relação estreita entre o aumento da atividade da 5’ND e o grau de invasão metastática. O aumento da atividade da 5’ND pode preceder o das bilirrubinas. A determinação concomitante das atividades enzimáticas das fosfatases alcalinas e da 5’ND se presta ao diagnóstico diferencial das hiperfosfatasemias de origem óssea ou hepato-biliar.
Sitiografia:
E-mail do autor: ciriades@yahoo.com
http://www.chem.qmul.ac.uk/iubmb/enzyme/EC3/2/2/5.html
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